Ny mikroskopimetod med ProDOL-tekniken förbättrar cellfunktionernas insikt genom förbättrad proteinmärkning.
StockholmForskare har utvecklat en ny metod som kallas Protein-tag Degree of Labelling (ProDOL) för att mer exakt räkna märkta proteiner i levande celler. Forskare från University of Birmingham, tillsammans med internationella samarbetspartners, har tagit fram denna teknik för att bättre förstå hur celler fungerar. ProDOL förbättrar nuvarande metoder genom att ge precisa mätningar av märkningsgrad, vilket är avgörande för korrekt mätning av proteiner inom biologisk forskning.
Forskare har under en längre tid använt fluorescensmikroskopi för att studera proteiner i celler. Denna metod möjliggör observation och mätning av proteiner, men dess noggrannhet är beroende av att veta hur många proteiner som har märkts med fluorescerande markörer, vilket kallas märkningsgrad (DOL). Nuvarande tekniker har problem med inkonsekvent märkning och oönskade signaler.
Fördelar med ProDOL omfattar:
- Snabb och tillförlitlig kvantifiering av märkningsgrader
- Exakta mätningar av proteinkopior i cellstrukturer
- Optimering av strategier för märkning med proteintagg
- Hög mångsidighet, kan appliceras på olika celltyper och experimentella förhållanden
I vissa forskningsmiljöer har ProDOL visat sig vara effektivt. Till exempel användes det för att studera HIV-1-viruset och dess påverkan på CD4 T-immunceller. Arbetet med professor Oliver Fackler från Heidelbergs universitetssjukhus visade att ProDOL är bra på att mäta både totala och aktiva hjälparproteiner i dessa immunceller.
ProDOL kan förändra vår förståelse av cellulär signalering. Noggrann mätning av proteiner är avgörande för att studera immunsvar och aktivering av blodplättar. Detta är viktigt för sjukdomar som inflammation, immunbrister och hjärtproblem. Forskare kan nu studera dessa cellulära funktioner mer exakt, vilket kan leda till förbättrade behandlingar och utveckling av nya läkemedel.
ProDOL är mycket användbart inom många områden av biomedicinsk forskning. Det säkerställer precisa och exakta resultat, vilket minskar risken för fel och missmatchningar. Denna noggrannhet är avgörande för seriös forskning, som att kontrollera om läkemedel fungerar eller studera hur sjukdomar påverkar celler.
ProDOL är ett viktigt nytt verktyg inom mikroskopi. Det underlättar mätning av proteiner och studier av celler på ett mer effektivt sätt. Denna teknik kommer sannolikt att användas i många laboratorier världen över och stödja ny forskning och medicinska behandlingar.
Studien publiceras här:
http://dx.doi.org/10.1038/s41592-024-02376-6och dess officiella citering - inklusive författare och tidskrift - är
Stanimir Asenov Tashev, Jonas Euchner, Klaus Yserentant, Siegfried Hänselmann, Felix Hild, Wioleta Chmielewicz, Johan Hummert, Florian Schwörer, Nikolaos Tsopoulidis, Stefan Germer, Zoe Saßmannshausen, Oliver T. Fackler, Ursula Klingmüller, Dirk-Peter Herten. ProDOL: a general method to determine the degree of labeling for staining optimization and molecular counting. Nature Methods, 2024; DOI: 10.1038/s41592-024-02376-6Dela den här artikeln