Nuova tecnica microscopica svela segreti funzionali delle cellule grazie al ProDOL

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Di Maria Astona
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Microscopio avanzato che mostra proteine etichettate in cellule vive.

RomeScienziati hanno ideato un nuovo metodo chiamato Protein-tag Degree of Labelling (ProDOL) per contare in modo più preciso le proteine etichettate nelle cellule viventi. Ricercatori dell'Università di Birmingham, insieme a partner internazionali, hanno sviluppato questa tecnica per comprendere meglio il funzionamento delle cellule. ProDOL migliora i metodi attuali fornendo misurazioni precise dell'efficienza di etichettatura, elemento cruciale per misurare correttamente le proteine nella ricerca biologica.

Gli scienziati hanno utilizzato per molti anni la microscopia a fluorescenza per studiare le proteine all'interno delle cellule. Questo metodo consente di visualizzare e misurare le proteine, ma la sua precisione dipende dalla conoscenza del numero di proteine marcate con etichette fluorescenti, chiamato grado di marcatura (DOL). Le tecniche attuali presentano problemi di marcatura incoerente e segnali indesiderati.

Vantaggi di ProDOL:

  • Quantificazione rapida e affidabile delle efficienze di marcatura
  • Misurazioni precise del numero di copie proteiche nelle strutture cellulari
  • Ottimizzazione delle strategie di marcatura dei tag proteici
  • Alta versatilità, applicabile a diversi tipi di cellule e condizioni sperimentali

In determinate contesti di ricerca, ProDOL si è rivelato efficace. Ad esempio, è stato impiegato per studiare il virus HIV-1 e il suo impatto sulle cellule immunitarie CD4 T. Collaborando con il Professor Oliver Fackler dell'Ospedale Universitario di Heidelberg, è stato dimostrato che ProDOL è efficace nel misurare sia il numero totale che quello attivo delle proteine helper in queste cellule immunitarie.

ProDOL potrebbe rivoluzionare la nostra comprensione del segnalamento cellulare. La misurazione precisa delle proteine è cruciale per studiare le risposte immunitarie e l'attivazione delle piastrine. Questo è rilevante per malattie come l'infiammazione, le immunodeficienze e i problemi cardiaci. Gli scienziati ora possono analizzare queste funzioni cellulari con maggiore precisione, aprendo la strada a trattamenti migliori e nuovi farmaci.

ProDOL è estremamente utile in molte aree della ricerca biomedica. Permette di ottenere risultati precisi e accurati, riducendo errori e discrepanze. Questa precisione è fondamentale per ricerche importanti, come verificare l'efficacia dei farmaci o studiare l'impatto delle malattie sulle cellule.

ProDOL è uno strumento innovativo nel campo della microscopia. Contribuisce a misurare le proteine e a studiare le cellule in modo più efficiente. Questa tecnica sarà probabilmente adottata in molti laboratori a livello globale, sostenendo nuove ricerche e trattamenti medici.

Lo studio è pubblicato qui:

http://dx.doi.org/10.1038/s41592-024-02376-6

e la sua citazione ufficiale - inclusi autori e rivista - è

Stanimir Asenov Tashev, Jonas Euchner, Klaus Yserentant, Siegfried Hänselmann, Felix Hild, Wioleta Chmielewicz, Johan Hummert, Florian Schwörer, Nikolaos Tsopoulidis, Stefan Germer, Zoe Saßmannshausen, Oliver T. Fackler, Ursula Klingmüller, Dirk-Peter Herten. ProDOL: a general method to determine the degree of labeling for staining optimization and molecular counting. Nature Methods, 2024; DOI: 10.1038/s41592-024-02376-6
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